Mục tiêu: Thẩm định phương pháp xác định đồng thời 4-hydroxyderricin và xanthoangelol trong thực phẩm chức năng bằng sắc ký lỏng hiệu năng cao với detector mảng diod.
Phương pháp: 4-hydroxyderricin và xanthoangelol được chiết ra khỏi nền mẫu bằng cách siêu âm trong hỗn hợp methanol/nước (8/2) trong 30 phút và được tách bằng cột sắc ký pha đảo C18, pha động gồm methanol và nước. Tốc độ dòng là 1mL/phút, bước sóng của detector được cài đặt 370 nm.
Kết quả: Khoảng tuyến tính của 4-hydroxyderricin từ 4,7 – 235 µg/ml và xanthoangelol từ 5,35 – 267,5 µg/ml với hệ số tương quan R ≥ 0,9996. Giới hạn định lượng của 4-hydroxyderricin và xanthoangelol tương ứng là 0,24 mg/g và 0,35 mg/g. Phương pháp có độ thu hồi nằm trong khoảng từ 95,7 – 100,7%, với hệ số biến thiên (CV%) từ 2,9 – 4,6%.
Kết luận: Các thông số thẩm định của phương pháp đạt yêu cầu theo AOAC. Đây là phương pháp đơn giản, đáng tin cậy và có thể sử dụng để nghiên cứu và kiểm soát hàm lượng 4-hydroxyderricin và xanthoangelol trong thực phẩm chức năng.
Aims: To validate a method to determine of 4-hydroxyderricin và xanthoangelol concentration in functional food by high performance liquid chromatography with a photodiode array detector.
Methods: 4-hydroxyderricin and xanthoangelol were extracted by sonication in methanol 80% in water for 30 min and separated by a reversed phase C18 column using a mobile phase including methanol and water. The flow rate was set to 1.0 ml.min-1 and the PDA detector was performed at 370 nm.
Results: The validated method proved to be linear in the range of 4.7 – 235 µg.ml-1 for 4-hydroxyderricin and 5.35 – 267.5 µg.ml-1 for xanthoangelol with R was 0.9999, respectively. The quantification limit of 4-hydroxyderricin and xanthoangelol were 0.24 mg/g and 0.35 mg/g, respectively. The recovery of 4-hydroxyderricin và xanthoangelol was within the range of 95.7 – 100.7%, with the coefficient of variation (CV%) of 2.9 - 4.6%.
Conclusion: The validated parameters have met the requirement of Association of Official Analytical Collaboration (AOAC). This reliable method would be useful for the study and quality control of 4-hydroxyderricin và xanthoangelol in functional food.